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細(xì)胞培養(yǎng)專題——6孔板接種和換液

發(fā)布日期: 2021-09-15
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 細(xì)胞培養(yǎng)專題——6孔板接種和換液
 ?。?)問(wèn):我的細(xì)胞傳代很正常,但一種到六孔板里(不管加藥和對(duì)照),總有兩三個(gè)孔(隨機(jī))細(xì)胞長(zhǎng)得不好,很小,像破碎了。有人遇到過(guò)這種情況嗎?到底是啥原因呢?請(qǐng)各位指點(diǎn)
  答:可能跟你加液的溫度有關(guān)。如果你細(xì)胞剛剛拿出來(lái)?yè)Q液加液,培養(yǎng)基也是從4度冰箱拿出來(lái)不久,很容易細(xì)胞就會(huì)凍死了。建議你最好把培養(yǎng)基先在培養(yǎng)箱里邊孵育15min先。
  另外,跟你細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)也有關(guān)。加藥之前的細(xì)胞可以用高點(diǎn)的血清濃度培養(yǎng)。保證細(xì)胞狀態(tài)良好。
  或者放在37度水浴鍋里孵育也可以,或者是培養(yǎng)板本身的問(wèn)題,你再換換其他培養(yǎng)板試試看。再有可能就是細(xì)胞狀態(tài)問(wèn)題了,種板時(shí)的血清濃度調(diào)高試一下
  (2)問(wèn):最近幾天,我用六孔培養(yǎng)板接種細(xì)胞,培養(yǎng)24小時(shí)后更換培養(yǎng)基,在更換培養(yǎng)基之前,顯微鏡觀察到細(xì)胞貼壁,狀態(tài)非常的好,更換了培養(yǎng)基后,立即用顯微鏡觀察,發(fā)現(xiàn)每個(gè)孔中都近乎有一半的細(xì)胞表現(xiàn)出近乎死亡的狀態(tài)。細(xì)胞變得非常小,產(chǎn)生大量的碎片,而另一半的細(xì)胞一切正常,異常細(xì)胞與正常細(xì)胞之間存在一條分水嶺,上半個(gè)圓是好的,下半個(gè)圓就不好,這是怎么一回事?
  答:你可以看一下是不是培養(yǎng)板沒(méi)放水平。有一回我也出現(xiàn)過(guò)這種情況。你的培養(yǎng)液如何,如果培養(yǎng)液過(guò)期,細(xì)胞就不會(huì)貼壁。換一點(diǎn)新配制的培養(yǎng)液試一試。我也經(jīng)常碰到,我想可能是板的問(wèn)題,換一個(gè)牌子的板或換用培養(yǎng)瓶就沒(méi)問(wèn)題了。不知樓主所需換液的培養(yǎng)板多不多,換培養(yǎng)基的時(shí)候如果沒(méi)有注意風(fēng)機(jī)的影響,特別是所需換液的培養(yǎng)板很多時(shí),容易使細(xì)胞因風(fēng)吹失水而干縮破裂。如果如此,換液時(shí)應(yīng)該逐個(gè)培養(yǎng)板進(jìn)行,別怕浪費(fèi)吸管,注意操作的效率!
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